类风湿性关节炎(RA)是一种以关节炎症为特征的慢性自身免疫性疾病。巨噬细胞通过不断的细胞积累和细胞因子的分泌，加速RA的病理过程。因此，巨噬细胞的多尺度可视化对RA的早期诊断具有重要意义。在这项工作中，开发了叶酸受体靶向的Cptnc-4F纳米探针，命名为FA-CF-NPs，用于RA小鼠模型巨噬细胞的双模型分子成像。FA-CF-NPs具有互补的成像优势，在第二近红外窗口(NIR-Ⅱ)具有较高的荧光灵敏度和分辨率，并且具有良好的光声(PA)成像与深部组织穿透的对比度。FA-CF-NPs表面的叶酸配体对叶酸受体过表达的巨噬细胞具有高亲和力，确保了纳米探针在体内成像的特异性靶向功能。利用FA-CF-NPs实现NIR-Ⅱ荧光成像，准确定位关节内巨噬细胞，获得15.5的高信本比(SBR)。同时进行PA成像，观察全关节纵切面巨噬细胞分布。此外，在没有滑膜炎和软骨丢失等RA病理的小鼠关节中检测到巨噬细胞浸润。该结果为RA的体内巨噬细胞追踪和早期诊断提供了机会。